作者：刘彩娟，罗清华，李威
摘要：牛病毒性腹泻病一直严重影响着畜牧业的发展，给畜牧业和相关商业领域造成了巨大的经济损失。本文就牛病毒性腹泻病的病原特性、实验室诊断方法、对养牛生产的影响、及其防控措施的研究进展进行了概述，以此来提高对此类疾病的预防意识，为从根本上减少该病的发生提供借鉴与参考。
关键词：牛病毒性腹泻病毒；诊断；防控
牛病毒性腹泻病（Bovinviraldiarrha，BVD），是由牛病毒性腹泻病毒（Bovinviraldiarrhavirus，BVDV）引起的一种疾病，又称黏膜病。牛病毒性腹泻病呈世界性分布，在养牛业发达国家尤其严重，造成该病广泛流行的原因是牛病毒性腹泻病毒可以感染各个年龄段的牛。
其临床症状主要表现为腹泻，急、慢性黏膜病，持续性感染与免疫耐受，免疫抑制，母畜流产、死胎和畸胎等。急性感染可表现为短暂的腹泻或者肺炎，通常呈群组暴发流行。急性型通常有出血综合征，死亡率高。犊牛感染该病毒通常比较温和且不表现临床症状。
1病原基本特性
牛病毒性腹泻病毒（BVDV）又称为牛病毒性腹泻-黏膜病病毒（BVD-MDV），或黏膜病病毒（Mucosaldisasvirus，MDV），在分类学上属于黄病毒科（Flavivirida）瘟病毒属（Pstivirus），与猪瘟病毒（Classicalswinfvrvirus，CSFV）在血清学上发生交叉反应，并能够突破宿主的特异性发生交叉感染，因此该病毒感染牛的同时还能够感染绵羊、山羊、猪、鹿及其他反刍动物。
根据可否使培养细胞产生细胞病变（CPE），可把BVDV毒株分为非致细胞病变型（NCP）和致细胞病变型（CP）两类。非致细胞病变（NCP）型BVDV引起的是持续性感染，当持续感染动物再次感染抗原性相似或同源的致细胞病变（CP）型病毒时就会发生黏膜病。
2实验室诊断方法
目前用于诊断BVDV的方法很多，如琼脂扩散试验、病毒分离、荧光抗体试验、ELISA、PCR技术等。
2.1病原学诊断
2.1.1病毒分离鉴定
采集患病牛病料，接种于犊牛睾丸细胞或牛肾继代细胞将病原体从病料中分离出来，盲传几代后观察细胞病变情况。
2.1.2动物接种实验
取待检病料，用灭菌的组织捣碎器研磨，加入双抗后，取上清液对6月龄健康犊牛进行接种。
2.1.3电镜检查
可应用电镜负染法对新鲜病料或细胞培养物进行直接观察，也可制作成超薄切片标本进行观察，或用铬投射的电子显微照相技术测量病毒粒子的大小和形态。该法方便、快捷、直观，但用于电镜检查的病毒液需达到一定的浓度，一般不低于个病毒粒子/mL。
2.2血清学诊断
2.2.1琼脂扩散实验
琼脂扩散实验是选取发炎或糜烂组织周围的黏膜，不经任何处理，直接与阳性血清进行琼脂扩散实验。此方法是群特异性的，没有株特异性，而且敏感性也不如血清中和实验。据统计，约有60％的病牛呈现阳性反应。这种方法准确性不高，但从我国目前基层兽医部门的设备条件实际出发，它可以作为生产实践中进行流行病学调查的手段之一。
2.2.2中和实验
中和实验是一种检测特异性抗体的技术。目前，用于该病诊断的主要是细胞水平上的中和试验，即用已知的BVDV与被检血清作用后再接种牛睾丸细胞或犊牛肾细胞，观察CP情况。
2.2.3免疫荧光技术
通常使用直接免疫荧光法检测感染细胞培养物中的病毒粒子，荧光颗粒出现于胞浆中，并可用未标记抗体进行荧光抑制试验做进一步鉴定。该诊断方法特异性强、敏感性高、速度快，但缺点是非特异性染色问题尚未完全解决．使结果判定的客观性不足，技术程序也还比较复杂，不适用于基层兽医检测。
2.2.4酶联免疫吸附试验
主要包括抗原捕获ELISA、间接ELISA、ABS-ELISA、双抗体夹心ELISA、单抗夹心ELISA、竞争ELISA以及M-ELISA等，ELISA具有独特的优点，该方法能检测大批样品，其所需设备简单，容易操作，而且具有特异、敏感、快速等特点，在控制和根除BVDV方面发挥着越来越重要的作用。
2.2.5分子生物学实验技术
主要有反转录一多聚酶链式反应（RT—PCR）和核酸杂交实验（NAH）技术。PCR方法用于该病的诊断，敏感性高、特异性强。进行该项试验所需的仪器和试剂费用昂贵，引物合成比较困难，因此PCR方法尚不能广泛应用于牛病毒性腹泻的临床诊断。
3对养牛生产的影响
牛病毒性腹泻病给牛场带来的经济损失主要体现在：牛奶产量减少、低受孕率及犊牛疾病和损失。该病毒主要是通过与牛的分泌物（鼻、口腔、生殖器）直接接触传播。
3.1持续性感染
由于持续性感染是通过母畜垂直传播的，因而母牛所产的犊牛也呈持续性感染。持续性感染的犊牛有些表现早产、死产、先天性缺陷、发育不良、嗜眠和哺乳困难，有些表现对疾病的抵抗力消失而死亡，但多数持续感染牛外观健康。
唐新仁等（）研究表明，饲养43头持续感染牛（PI）的总饲养直接投入为．5元，且不包括8头淘汰牛（7头直接死亡、1头因不孕淘汰）的成本，也不包括配种时使用的冻精成本，此外因BVDV造成的间接成本还有对其他牛造成的死亡、流产、不孕以及继续提高持续感染牛比率等等。因此，对牧场来说，持续感染牛没有任何饲养价值。
3.2免疫抑制
病毒对宿主的免疫抑制是导致重症疾病的诱因。免疫抑制是BVDV急性感染的一种表现形式．其后果是损害机体的免疫机能，增强其他病原体如副流感病毒Ⅲ型、传染性鼻气管炎病毒、冠状病毒、轮状病毒、巴氏杆菌、沙门氏杆菌和球虫的致病性，导致疾病多发和生产力下降，如呼吸道病、繁殖率下降、产奶量下降、泌乳期缩短等，犊牛表现生长发育不良，也可引起感染牛的死亡。
怀孕牛发生BVDV感染时可垂直传播给胎儿，导致胎儿被吸收、胎儿先天性缺陷、流产、死胎或弱犊，胚胎期感染而出生的犊牛，可终身带毒，并在牛场中不断排放大量病毒，污染牛场，引起牛病毒性腹泻的传播。
3.3黏膜病（MD）和慢性BVD
黏膜病主要表现为发病突然，重度腹泻，白细胞减少，大量流涎，口腔黏膜糜烂和溃疡，可在发病后几天死亡。慢性BVD表现为间歇性腹泻，并表现出里急后重，后期便中带血并有大量的黏膜，可在发病几周或数月死亡。这两种形式的发病率低，但死亡率可达90％。
3.4繁殖障碍
BVDV是引起牛繁殖障碍的一种重要病原。在受精时以及胚胎发育的早期到中期感染BVDV能引起不孕、胚胎死亡、产木乃伊胎、弱胎、畸形胎或死产，给生产者带来巨大的经济损失。
3.5血小板减少症和出血综合征
血小板减少和出血综合征是近年来由强毒力NCP型BVDV引起的一种新的BVD临床类型，特点是血小板减少和出血。
4防控措施
有效预防奶牛病毒性腹泻的发生，应做好以下几方面工作：
4.1加强检疫
首先对引进牛一定要进行隔离和检疫，避免将病牛引入牛场。其次对牛场内的奶牛定期进行检疫，及时掌握牛场中BVDV的流行动态。
4.2淘汰持续感染牛和免疫耐受动物
从外观上看体型较小，腰围细、身短、胸围小，表现出典型的生长发育不良，比同龄牛几乎小2～5月龄，这种牛可疑为持续感染牛，予以淘汰。大型牛场持续感染牛筛选的方法是首先接种灭活苗2次以建立初始免疫，然后对牛群进行血清学检测，血清抗体滴度低（1/64）或无抗体的牛应怀疑为持续感染牛，用单核细胞分离病毒，若能分离出病毒则确定为持续感染牛予以淘汰。
4.3疫苗接种
疫苗接种是控制BVD的重要方法。怀孕牛、应激牛和病牛应避免使用弱毒苗。灭活BVDV疫苗对妊娠母牛安全，通常需多次免疫，目前国内尚无该疫苗，可使用国外生产的BVDV灭活苗，但BVDV的初始免疫至少需要2次接种才能建立，应用时应加以注意。
4.4加强饲养管理
规范奶牛小区管理，科学调配饲料，提高奶牛体质，增强预防意识，减少该病的发生。
牛病毒性腹泻病具有特征性的临床症状的较少，在实际生产中常常不易被诊断，加之本病的病死率不高，未能引起人们的足够重视而忽视本病的存在，各牛场牛群缺乏系统的监测防制措施，这也是导致我国牛群BVDV感染日益扩大的原因之一。因此对牛群进行普查，检测其感染情况，淘汰感染个体，成为本病防制的重要环节，同时，普及奶牛病毒性腹泻有关知识，提高牧场管理者的预防意识，才有可能从根本上减少该病的发生。
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