鸡传染性喉气管炎（ILT）是由α疱疹病毒引起的一种鸡的急性上呼吸道传染病。该病呈世界性流行，常因其病毒毒力不同导致病症的严重程度各异，重者死亡率可达70%。病鸡临床主要特征为呼吸困难，咳嗽，咳出带血液的渗出物，死亡率高，产蛋率下降；病理变化以病鸡气管粘膜肿胀、出血并形成糜烂，喉部肿胀出血，严重时有黄色干酪样渗出物堵塞，导致窒息死亡。目前对本病尚无有效的治疗药物，一般采取疫苗免疫预防。在实际生产中，疫苗的首免时间和免疫剂量对鸡传染性喉气管炎的免疫效果有重要影响。为此，我们进行了不同首免日龄、不同免疫剂量的鸡传染性喉气管炎冻干苗（喉必妥）的免疫保护试验，以确定最佳的首免日龄和免疫剂量。材料与方法11.1材料1.1.1喉必妥由瑞普保定生物药业有限公司生产，生产批号为，每瓶羽份，每羽份含量≥.7EID50；1.1.2试验动物21日龄青脚麻鸡30只，28日龄青脚麻鸡80只（由沧州温氏集团提供）；1.1.3攻毒毒株瑞普（保定）诊断研究中心分离的ILT病毒AH株。1.2方法1.2.1ILT攻毒株的传代复壮将ILTAH15株稀释后接种鸡胚，孵化h后收获死胚、活胚的尿囊液和绒毛尿囊膜备用。1.2.日龄青脚麻鸡接种反应试验及称重将21日龄青脚麻鸡30只，随机分为3组，每组10只，第1、2组为疫苗免疫组，第3组为空白对照组，将喉必妥冻干苗用PBS分别稀释成每50μl含毒量为0.5羽份、1羽份的疫苗液，分别免疫1、2组试验鸡，免疫途径为点眼，每只鸡接种50μl。免疫后每天观察鸡只的精神状态、饮水和采食变化、呼吸道症状以及鸡的眼睛变化等并做记录，同时在接种后14天、21天和28天称体重。对接种反应评级并打分进行量化，具体标准如下：鸡只出现甩头、咳嗽、有呼吸道反应的均计为严重（2分），出现羞明的计为3分。1.2.日龄青脚麻鸡接种反应试验及称重将28日龄的青脚麻鸡，随机分为8组，每组10只，第1-7组为疫苗免疫组，第8组为空白对照组，将喉必妥冻干苗用PBS分别稀释成每50μl含毒量为0.2羽份、0.5羽份、0.8羽份、1羽份、2羽份、5羽份和10羽份的疫苗液，分别免疫1-7组试验鸡；将21日龄的青脚麻鸡随机分为2组（0.5和1羽份免疫剂量）。免疫途径为点眼，每只鸡接种50μl。免疫后每天观察鸡只的精神状态、饮水和采食变化、呼吸道症状以及鸡的眼睛变化等并做记录，同时在接种后14日龄和21日龄称体重。对接种反应评级并打分进行量化，具体标准同试验1.2.2。1.2.4免疫保护力试验21日龄免疫组和28日龄免疫组分别在ILT疫苗免疫后21天，进行喉内灌注.0EID50/0.2ml的ILTV（AH），观察10天，每日观察鸡的发病及死亡情况，并对死亡鸡剖检，观察病理变化。为了更好的表达免疫保护力效果，对鸡只的临床表现进行量化，标准如下：结果22.日龄青脚麻鸡不同免疫剂量疫苗接种反应：结果见表1表日龄青脚麻鸡不同免疫剂量免疫副反应鸡只数及分值表注：分子为免疫副反应的鸡只数，分母为分值总和。2.日龄青脚麻鸡不同免疫剂量疫苗接种反应结果见表2表日龄青脚麻鸡不同免疫剂量免疫副反应鸡只数及分值表注：分子为免疫副反应的鸡只数，分母为分值总和。从表1、表2可以看出，在免疫剂量相同的条件下，21日龄免疫组的免疫副反应明显大于28日龄免疫组，引起免疫副反应的鸡只数明显多于28日龄免疫组，免疫副反应持续时间也延长。21日龄和28日龄免疫组，在喉必妥免疫后3-4天，除1组（0.2羽份/只）外，各个免疫剂量组开始出现轻微流泪症状，眼结膜发红、充血，采食量减少，部分鸡眼睑肿胀、出现呼吸道症状，经过2-7天时间即可恢复正常。28日龄免疫组，随着免疫剂量的增大，出现免疫副反应鸡只数逐渐增多、副反应逐渐加重、持续时间逐渐延长。2.日龄青脚麻鸡免疫后体增重（g）比较结果见表3表日龄免疫青脚麻鸡后体增重（g）比较2.日龄青脚麻鸡免疫后体增重（g）比较：结果见表4
表日龄免疫青脚麻鸡后鸡群体增重（g）比较
从表3、表4可以看出，21日龄0.5羽份/只和1羽份/只免疫剂量组鸡群周体增重明显少于28日龄0.5羽份/只和1羽份/只免疫剂量组；21日龄和28日龄两个免疫日龄组，都随着免疫剂量的增加，对鸡只的周增重影响加重。2.5免疫保护力实验
2.5.日龄青脚麻鸡免疫组攻毒保护试验结果见表5
表日龄免疫组攻毒保护试验病死鸡只数及分值注：分子为攻毒后有临床症状的鸡只数，分母为所有临床症状鸡只评分分值总和。2.5.日龄青脚麻鸡免疫组攻毒保护试验结果见表6表日龄免疫组攻毒保护试验病死鸡只数及分值注：分子为攻毒后有临床症状的鸡只数，分母为所有临床症状鸡只分值总和。攻毒后观察到10天，21日龄免疫的青脚麻，对照组有4只死亡，免疫组均未出现死亡。28日龄免疫的青脚麻鸡，对照组有3只死亡，各个免疫组均为出现死亡。从表5、表6看出，21日龄免疫组，免疫剂量为0.5羽份/只鸡时，攻毒时有两只鸡只表现出临床症状，未出现死亡，对照组有8只鸡出现眼炎和呼吸道症状，且症状较严重。28日龄免疫组，免疫剂量为0.2羽份/只鸡时，攻毒时仅有一只鸡只表现出临床症状，但均未出现死亡。讨论3
通过免疫副反应试验发现，在相同免疫剂量条件下，21日龄免疫组免疫后其副反应分值明显比28日龄免疫组高；同时，通过对免疫后测体重发现，21日龄免疫组的体增重幅度明显小于28日龄免疫组，由此我们推荐免疫日龄为28日龄。
通过接种反应试验发现，在应用1羽份以下的免疫剂量免疫时，鸡群的免疫副反应相对较小，而且鸡群在5天内即可恢复，同时鸡群的周体增重也相对较大；通过免疫保护力试验（28日龄免疫组）得知，0.2羽份以上的免疫剂量对鸡群产生较好的保护力，但随着免疫剂量的增大，免疫反应逐渐加重。因此对于青脚麻鸡的喉必妥免疫，建议每只鸡应用0.5羽份的剂量。
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